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一種鑒別等位基因類型的方法

時間:2026-04-12    作者:admin 點擊: ( 2 ) 次

【摘要】 本發(fā)明公開了一種鑒別等位基因的方法。該方法 是以待測樣品的DNA為模板,用待檢測目的基因的一個或一 個以上突變位點對應的等位基因的引物組和不具有5′→3′ 外切核酸酶活性的DNA聚合酶,進行多重PCR擴增包括突變 位點在內的待測目的基因的等位基因片段,將得到的多重PCR 擴增產物與通用芯片雜交,根據(jù)雜交結果確定是哪種等位基 因;所述引物組包括一種通用引物,和用于擴增每種目的基因 的每個突變位點對應的兩種等位基因特異性引物和一種共用 引物;所有的等位基因特異性引物中每種引物的5′端均連接 有不同的Tag序列;所述通用芯片包括若干種Tag探針,所述 Tag探針與所述Tag序列相同,其中,每一種Tag探針只與多 重PCR產生的互補序列雜交結合。 【專利類型】發(fā)明申請 【申請人】博奧生物有限公司; 清華大學 【申請人類型】企業(yè),學校 【申請人地址】102206北京市昌平區(qū)生命科學園路18號 【申請人地區(qū)】中國 【申請人城市】北京市 【申請人區(qū)縣】昌平區(qū) 【申請?zhí)枴緾N200610089526.7 【申請日】2006-06-30 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1896284A 【公開公告日】2007-01-17 【公開公告年份】2007 【授權公告號】CN1896284B 【授權公告日】2013-09-11 【授權公告年份】2013.0 【IPC分類號】C12Q1/68 【發(fā)明人】李彩霞; 高華方; 劉湘; 蔡斌; 張地; 程京 【主權項內容】1、一種鑒別等位基因類型的方法,是以待測樣品的基因組DNA為模板,用待 檢測目的基因的一個或一個以上突變位點對應的等位基因的引物組和不具有 5′→3′外切核酸酶活性的DNA聚合酶,進行多重PCR擴增包括突變位點在內的待 測目的基因的等位基因片段,將得到的多重PCR擴增產物與通用芯片雜交,根據(jù) 雜交結果確定是哪種等位基因; 所述引物組包括一種通用引物,和用于擴增每種目的基因的每個突變位點對 應的兩種等位基因特異性引物和一種共用引物;每種等位基因特異性引物的5′端 均連接有不同的Tag序列; 所述Tag序列可以和所述多重PCR產物具有的互補Tag序列雜交,所有的Tag 序列的Tm值之差小于等于5℃,相互之間以及與所有的引物之間沒有交叉雜交, 并且無發(fā)夾結構,與含有所述目的基因的物種的基因組的同源性較低; 所述通用芯片包括若干種Tag探針,所述Tag探針與所述Tag序列一一對應, 一種Tag探針含有只與其相對應的Tag序列相同的寡核苷酸序列;其中,每一種 Tag探針可以與多重PCR反應產生的互補的序列雜交。 【當前權利人】北京博奧晶典生物技術有限公司; 清華大學 【當前專利權人地址】北京市大興區(qū)經濟開發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號院生物醫(yī)藥園C座; 北京市海淀區(qū)清華園 【專利權人類型】公立 【統(tǒng)一社會信用代碼】12100000400000624D 【引證次數(shù)】3.0 【被引證次數(shù)】32 【他引次數(shù)】3.0 【被自引次數(shù)】5.0 【被他引次數(shù)】27.0 【家族引證次數(shù)】12.0 【家族被引證次數(shù)】57

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